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ATCC細(xì)胞株與細(xì)胞系的區(qū)別

更新時(shí)間:2016-12-16      點(diǎn)擊次數(shù):5118
     ATCC細(xì)胞株一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化貼壁細(xì)胞成單個(gè)細(xì)胞,也可加入乙二胺四乙酸(EDTA)提高消化能力,EDTA 是一種二價(jià)離子的螯合劑,能抑制細(xì)胞膜上的Ca2+和Mg2+。常用的細(xì)胞消化液一般含有0.25%(w/v)的胰酶和0.03% (w/v) EDTA,一般用不含Ca2+和Mg2+的鹽溶液配置,先用胰酶-EDTA 消化液清洗細(xì)胞(5.0 -10.0 ml/75cm),然后棄去消化液,重新加入少量的胰酶-EDTA 消化液(2.0 to 5.0 ml/75 sq. cm flask) ,觀察ATCC細(xì)胞株直到細(xì)胞變圓脫離瓶壁,此過(guò)程一般需要5-15分鐘,為了避免細(xì)胞成團(tuán),消化細(xì)胞的過(guò)程中不要拍打細(xì)胞瓶。對(duì)于特別難消化的細(xì)胞,可以加入胰酶EDTA 消化液后把細(xì)胞置于37°C 促進(jìn)消化,ATCC細(xì)胞株脫離瓶壁后,立刻加入含有血清的*培養(yǎng)基中止消化,血清中某些蛋白質(zhì)能夠抑制胰酶的活性。
    ATCC細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱(chēng)為細(xì)胞株,也就是說(shuō),細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
    原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱(chēng)為有限細(xì)胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞系,培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。 所以細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來(lái)講,可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對(duì)于人類(lèi)腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱(chēng)為連續(xù)性株或系。
    原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”,不能再傳下去。但是有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞系。在一些別的資料中,細(xì)胞株和細(xì)胞系的概念與我們教材上的說(shuō)法正好相反。課標(biāo)教材沒(méi)有再介紹這一對(duì)概念。這又是為什么呢?人教社編輯包春瑩老師(bcying)對(duì)這一疑點(diǎn)的解釋?zhuān)杭?xì)胞系和細(xì)胞株,兩者曾一度混用,導(dǎo)致有些文獻(xiàn)中概念不清。下面所指的概念是現(xiàn)在國(guó)內(nèi)外比較通用的,也是絕大多數(shù)研究者接受的觀點(diǎn)。
    原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功即稱(chēng)為細(xì)胞系(CellLine),因此細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱(chēng)為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱(chēng)為細(xì)胞株(CellStrain),也就是說(shuō),細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
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